X-GAL CAS:7240-90-6 98% balts vai gandrīz balts kristālisks pulveris
| Kataloga numurs | XD90008 |
| produkta nosaukums | X-Gal (5-brom-4-hlor-3-indolil-beta-D-galaktopiranozīds) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekulārā formula | C14H15BrClNO6 |
| Molekulārais svars | 408.63 |
| Uzglabāšanas informācija | -2 līdz -6 °C |
| Saskaņotais tarifu kodekss | 29 400 000 |
Produkta specifikācija
| Šķīduma izskats | Dzidrs, bezkrāsains līdz gaiši dzeltens šķīdums (50 mg/ml DMF:MeOH, 1:1) |
| Īpaša optiskā rotācija | -61,5 +/- 1 |
| Izskats | Balts vai gandrīz balts kristālisks pulveris |
| Tīrības HPLC | min 99% |
| Šķīdība (5 % DMF) | Šķīstošs (5 % w/v, DMF) |
| Ūdens KF | maks. 1% |
| Tests (HPLC uz bezūdens bāzes) | min 98% w/w |
X-gal lietojumi
X-gal (arī saīsināts BCIG no 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galaktopiranozīda) ir organisks savienojums, kas sastāv no galaktozes, kas saistīta ar aizvietotu indolu.Šo savienojumu sintezēja Džeroms Horvics un līdzstrādnieki 1964. gadā. Oficiālais ķīmiskais nosaukums bieži tiek saīsināts līdz mazāk precīzām, bet arī mazāk apgrūtinošām frāzēm, piemēram, bromhlorindoksilgalaktozīds.X no indoksila var būt X avots X-gal kontrakcijā.X-gal bieži izmanto molekulārajā bioloģijā, lai pārbaudītu enzīma β-galaktozidāzes klātbūtni tā parastā mērķa, β-galaktozīda, vietā.To izmanto arī šī enzīma aktivitātes noteikšanai histoķīmijā un bakterioloģijā.X-gal ir viens no daudzajiem indoksilglikozīdiem un esteriem, kas fermentu katalizētas hidrolīzes rezultātā rada nešķīstošus zilos savienojumus, kas līdzīgi indigo krāsai.
X-gal ir laktozes analogs, un tāpēc to var hidrolizēt ar β-galaktozidāzes enzīmu, kas šķeļ β-glikozīdisko saiti D-laktozē.X-gal, šķeļot ar β-galaktozidāzi, iegūst galaktozi un 5-brom-4-hlor-3-hidroksiindolu - 1. Pēc tam pēdējais spontāni dimerizējas un oksidējas par 5,5'-dibrom-4,4'-dihloru. -indigo - 2, intensīvi zils produkts, kas nešķīst.X-gal pati par sevi ir bezkrāsains, tāpēc zilas krāsas produkta klātbūtni var izmantot, lai pārbaudītu aktīvās β-galaktozidāzes klātbūtni.Tas arī ļauj baktēriju β-galaktozidāzi (tā saukto lacZ) izmantot kā reportieri dažādos lietojumos.
Divu hibrīdu analīzē β-galaktozidāzi var izmantot kā reportieri, lai identificētu proteīnus, kas mijiedarbojas savā starpā.Izmantojot šo metodi, genoma bibliotēkas var pārbaudīt proteīnu mijiedarbībai, izmantojot raugu vai baktēriju sistēmu.Ja starp pārbaudāmajiem proteīniem ir veiksmīga mijiedarbība, aktivācijas domēns saistīsies ar promotoru.Ja promotors ir saistīts ar lacZ gēnu, β-galaktozidāzes veidošanās, kuras rezultātā X-gal klātbūtnē veidojas zili pigmentētas kolonijas, norāda uz veiksmīgu mijiedarbību starp proteīniem.Šis paņēmiens var aprobežoties ar tādu bibliotēku skrīningu, kuru izmērs ir mazāks par aptuveni 106. Veiksmīga X-gal šķelšanās rada arī jūtami nepatīkamu smaku indola iztvaikošanas dēļ.
Tā kā X-gal pats par sevi ir bezkrāsains, zilas krāsas produkta klātbūtni var izmantot, lai noteiktu aktīvās β-galaktozidāzes klātbūtni.
Šī vieglā aktīvā enzīma identificēšana ļauj β galaktozidāzes gēnu (lacZ gēnu) izmantot kā reportiera gēnu dažādos lietojumos.
