Produkti

1. Metabolītu profilēšanas metodes ir svarīgi instrumenti metabolītu kopu mērīšanai bioloģiskajās sistēmās.Lai gan lielākā daļa metabolītu profilēšanas metožu ziņo par relatīvo intensitāti vai ir atkarīgas no dažiem iekšējiem standartiem, kas atspoguļo visus metabolītus, galvenā prasība metabolītu kopuma kvantitatīvā apraksta bioloģiskajās šūnās un šķidrumos ir absolūtās koncentrācijas noteikšana.Šeit mēs ziņojam par augstas caurlaidības un jutīgas gāzu hromatogrāfijas/tandēma masas spektrometrijas (GC/MS/MS) mērķtiecīgu metabolītu profilēšanas metodi, kas ļauj absolūtā kvantitatīvi noteikt visus atklātos metabolītus.Metodes pamatā ir metilhlorformiāta atvasināšana un kvantitatīva noteikšana, pievienojot paraugus ar metabolītu standartiem, kas atsevišķi atvasināti ar deuterētiem atvasināšanas reaģentiem.Tradicionālā elektronu triecienjonizācija tiek aizstāta ar pozitīvu ķīmisko jonizāciju, jo pēdējā daudz lielākā mērā saglabā molekulāro jonu un citus lielas molekulmasas fragmentus.Tas atviegloja unikālu MS/MS pāreju atlasi starp daudzajiem koeluējošiem metabolītiem.Pašlaik jaunā GC/MS/MS metode ietver 67 parastos primāros metabolītus, no kuriem lielākā daļa pieder pie aminoskābju un neaminoskābju grupām.Mēs parādām metodes pielietojamību urīna un seruma paraugiem.Metode ir būtisks pašreizējās metodoloģijas uzlabojums aminoskābju un neaminoorganisko skābju GC/MS metabolītu profilēšanai.

2,24S-hidroksiholesterīns (24OHC) un 27-hidroksiholesterīns (27OHC) ir divi strukturāli līdzīgi dažādas izcelsmes oksisterīni — pirmais gandrīz tikai veidojas smadzenēs, bet otrais mazākā mērā veidojas smadzenēs nekā lielākajā daļā citu orgānu.PĀRBAUDĒJAMĀ HIPOTĒZE: Neironu bojājumi un/vai demielinizācija izraisa palielinātu 24OHC plūsmu no smadzenēm cerebrospinālajā šķidrumā (CSF), savukārt defekts hematoencefālisko barjeru izraisa palielinātu 27OHC plūsmu no cirkulācijas uz cerebrospinālo šķidrumā. Izotopu atšķaidīšanas masa. spektrometrija tika izmantota, lai noteiktu abus oksisterīnus CSF un plazmā no vairāk nekā 250 pacientiem ar dažādām neiroloģiskām un geriatriskām slimībām. Abu oksisterīnu CSF līmeni daudz vairāk ietekmēja dažādas slimības nekā plazmas līmeni.Pacientiem ar aktīvām demielinizējošām slimībām bija paaugstināts 24OHC līmenis cerebrospinālajā šķidrumā ar salīdzinoši augstu 24OHC/27OHC attiecību.Pacientiem ar meningītu kopumā bija augsts abu steroīdu līmenis ar zemu 24OHC/27OHC attiecību.Pacientiem ar Alcheimera slimību bija nedaudz paaugstināts 24OHC līmenis cerebrospinālajā šķidrumā ar mazāku 27OHC pieaugumu.Pacientiem ar multiplo sklerozi bija tendence uz augstāku 24OHC līmeni aktīvajos periodos ar augstu 24OHC/27OHC attiecību. Divu oksisterīnu mērījumi CSF un plazmā var būtiski papildināt esošās neiroloģisko slimību novērtēšanas bioķīmiskās metodes.