ONPG CAS:369-07-3 98,0% minimālais balts vai gandrīz balts pulveris
| Kataloga numurs | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| produkta nosaukums | ONPG (2-nitrofenil-beta-D-galaktopiranozīds) |
| Molekulārā formula | C12H15NO8 |
| Molekulārais svars | 301.25 |
| Uzglabāšanas informācija | 2 līdz 8 °C |
| Saskaņotais tarifu kodekss | 29 400 000 |
Produkta specifikācija
| Tīrība (HPLC) | Min.98,0% |
| Izskats | Balts vai gandrīz balts pulveris |
| Risinājums(1% ūdenī) | Dzidrs, bezkrāsains vai viegli dzeltens šķīdums |
| Ūdens sastāvs(Kārlis Fišers) | Maks.0,5% |
| Īpatnējā optiskā rotācija [α]D20 (c=1, H2O) | -65,0 ° C līdz -73,0 ° C |
Diskusija par ONPG testu (β-galaktozidāzes tests)
Pēdējā laikā bieži tiek uzdoti jautājumi: 1. Kāpēc ONPG testu var izmantot, lai atšķirtu aizkavētu laktozes fermentāciju?2. Kāpēc valsts standartā ir noteikts, ka ONPG testam nepieciešams izmantot 3% nātrija hlorīda trisaharīda dzelzi (vai trisaharīda dzelzi)?3. Kāpēc Vibrio parahaemolyticus gadījumā, veicot OPNG testu, toluols jāpievieno pa pilienam saskaņā ar standartu?Kāda ir funkcija?
Mūsu uzņēmums ir izskatījis daudz informācijas, apkopojis to un kopīgojis to ar jums tālāk:
Princips: ONPG ķīniešu nosaukums ir o-nitrobenzol-β-D-galaktopiranozīds.ONPG var hidrolizēt galaktozē un dzeltenā o-nitrofenolā (ONP) ar β-galaktozidāzes palīdzību, tāpēc β-galaktozidāzes aktivitāti var noteikt, mainot barotnes krāsu.
Laktoze ir cukurs, kas jāatklāj lielākajai daļai mikroorganismu.Tā metabolismam nepieciešami divi enzīmi, viens ir šūnu permeāze, laktoze iekļūst šūnās permeāzes ietekmē;otra ir β-galaktozidāze, kas hidrolizē laktozi galaktozē.Laktoze un glikoze.β-galaktozidāze var arī tieši iedarboties uz ONPG, lai hidrolizētu to galaktozē un dzeltenajā o-nitrofenolā (ONP).To var izdarīt 24h, pat ar laktozes aizkavētajiem fermentatoriem.Tāpēc tas izskaidro novērošanas rezultātus, kas iegūti, paņemot kultūru 1 no agara slīpuma un inokulējot to pilnā aplī 36°C temperatūrā 1-3 stundas un 24 stundas.Ja tiek ražota β-galaktozidāze, tā kļūst dzeltena 1-3h laikā, ja tāda fermenta nav, tā nemainīs krāsu 24h laikā.
Saskaņā ar iepriekšminētajiem diviem fermentiem mikroorganismus var iedalīt šādās kategorijās:
1 laktozi fermentējoša (18-24 stundas) baktērijas ar permeāzi un β-galaktozidāzi P + G +;
2 Aizturēti laktozes fermentatori (ilgāk par 24 stundām), kuriem trūkst caurlaidības, bet kuriem ir galaktozidāze: P-G+.
3 Nelaktozes fermentatori, kuriem trūkst gan permeāzes, gan galaktozidāzes: P-G-.
ONPG testu var izmantot, lai atšķirtu laktozes nobīdi fermentējošās baktērijas (P-G+) no neraudzējošām laktozes baktērijām (PG-), piemēram:
1 Atšķirt vēlīnās laktozes fermentatorus (P-G+) no nelaktozes fermentatoriem (P-G-).
a) Citrobacter (+) un Salmonella arizonae (+) no Salmonella (-).
b) Escherichia coli (+) no Shigella sonnei (-).
Kāpēc ONPG tests tika veikts, izmantojot vienas nakts kultūru uz 3% nātrija hlorīda dzelzs trisaharīda (dzelzs trisaharīda)?Mūsu uzņēmums ir iepazinies ar daudz informācijas, taču skaidra paziņojuma nav.Tikai FDA tīmekļa vietnē ir rakstīts, ka "Inokulēt kultūras, kas tiks pārbaudītas uz trīskāršā cukura dzelzs agara slīpajām malām un inkubēt 18 stundas 37 °C temperatūrā (vai citā piemērotā temperatūrā, ja nepieciešams). Var izmantot arī % laktozes."nozīmē: testa baktērijas tika inokulētas uz trisaharīda dzelzs barotnes un kultivētas 37 °C temperatūrā 18 stundas.Ir pieļaujama arī slīpā (vai cita) barotne ar barotni, kas satur 1% laktozes.Tāpēc tiek secināts, ka trisaharīda dzelzs barotne satur laktozi.Pēc augšanas vienas nakts laikā baktērijas ir radījušas labu aktīvo β-galaktozidāzi.Izmantojot šādas baktērijas, ONPG var ātrāk sadalīt β-galaktozidāze.Eksperimentālā parādība ir ātrāka un labāk izpaužas.Turklāt, lai pilnībā atbrīvotu β-galaktozidāzi, pa pilienam pievieno toluolu un ūdens vannu 5 minūtes.
